1923年6月，中共三大确定了国共合作的方针，青年团随即于当年8月20日至25日在南京召开了中国社会主义青年团第二次全国代表大会。大会明确宣布，坚决拥护中共三大所确定的建立统一战线的方针，青年团要努力协助中国做好推进国民革命运动的工作。大会决定团员可以和员一样，以个人身份加入。大会首次以“决议案”的形式确定了领导青年团的原则规定。大会推选刘仁静任委员长。大会闭幕后，青年团选派团员和青年员到黄埔军校和农民讲习所学习。1924年5月，黄埔军校第一期开学，在500余名学员中有1/10的学员是青年团员或青年员。由彭湃和毛泽东主持的广州农民运动讲习所的学员全是18至28岁的青年，其中许多人是青年团员或员。
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